TRAzol
经典RNA提取试剂,可替代TRIzol
产品说明
TRAzol可以从动物组织、植物材料、各种微生物以及培养细胞等组织材料中提取总RNA。样品在TRAzol中能够充分被裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层),RNA分布在上清层中,收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。经本制品提取的总RNA纯度高,基本不含蛋白质及基因组DNA,提取的RNA可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
产品组分
| 货号 | R1021(20次) | R1022(100次) |
| TRAzol | 20 ml | 100 ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
需要自备氯仿、异丙醇、RNase-free 75%乙醇、DEPC处理水(R2041/R2042)
保存条件
室温运输,2-8℃避光保存。
注意事项
● TRAzol具有腐蚀性,操作过程中应做好防护,避免直接接触皮肤或吸入口鼻。沾染后应立即用大量清水冲洗,必要时请就医处理。
● 严防操作环境、使用的容器、耗材和试剂的RNase污染。操作过程中勤换手套。
● 根据起始材料量的不同使用不同体积的溶液(见下表)。过多或过少的使用量都可能影响RNA的质量或产量。若起始材料量很少,RNA预计产量很低,在异丙醇沉淀时,可加入20 mg/ml肝糖原溶液0.5-1 μl促进RNA沉淀。
● 不同起始材料试剂用量及TRAzol用量。
| 样品用量 | TRAzol的用量 |
| 10cm2的贴壁培养细胞 | 1 ml |
| 107的悬浮培养细胞 | 1-2 ml |
| 100 μl的白细胞 | 2 ml |
| 50-100 mg的普通组织样品 | 1 ml |
| 50-100 mg的特殊组织样品(肝、脾、骨及软骨等) | 2 ml |
| 15-30 mg的植物材料(多糖和多酚含量不高的) | 1 ml |
● 使用本产品提取的RNA一般不含有DNA污染。在极少数情况下(与组织pH值等相关),如果有DNA污染而又必须去除,则可以用RNase-free的DNase处理样品。
● 防止DNA污染方法:a. 减少样本起始用量,如将100 mg的植物组织减少为50 mg,将30 mg的动物组织减少为10 mg;
b. 在加入TRAzol之后加入5-10 ul 3M NaAc(pH5.2)。
● 请严格遵照操作步骤操作。
● 有关RNA的吸光度说明如下:
260 nm、320 nm、230 nm、280 nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白质等有机物的吸光度值。OD260/OD280(R)体现了RNA中的蛋白质等有机物的污染程度,质量较好的RNA的R值应在1.8-2.0之间,当R<1.8时,溶液中的蛋白质等有机物的污染比较明显;当R>2.2时,说明RNA已经被水解成了单核苷酸。在对核酸进行吸光度检测时,需要注意稀释液应使用TE Buffer。
● RNA浓度=(OD260-OD320)×稀释倍数×0.04 μg/μl





